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影响毛细管电泳仪峰面积重现性的因素及解决办法

发布时间:2021-03-03      点击次数:423
    毛细管电泳仪分析对进样技术要求很高,进样操作事项如下:
  1.进样区带越小越好:无论采用何种进样方式,毛细管插入样品溶液的深度一般要少于毛细管总长度的1%~2%,以尽量减少样品溶液经毛细吸附进入毛细管而影响进样量的性。样品管中溶液少为5μL,进样体积为1~50nL。
  2.进样时间以短为宜:通常进样时间为0.5~1s,此时毛细管粘附的样品量相对于吸入的体积可忽略不计。虽然毛细管电泳的进样时间可至±0.1s,但由于毛细管插入样品管时不可避免地会粘附一些溶液,进样时间过短会影响分析的重复性。
  3.样品预浓缩:受毛细管内总体积的制约,对于浓度很稀的样品,毛细管电泳不能象HPLC那样可加大进样量来提高检测灵敏度,但可采取一些措施来改善。
  毛细管电泳仪峰面积重现性的因素及解决办法:
  1.温度变化。
  原因与结果:改变粘度和进样量。
  解决办法:毛细管恒温。
  2.样品蒸发。
  原因与结果:增加样品浓度。
  解决办法:加盖和冷却自动进样器。
  3.样品过载。
  原因与结果:额外进样。
  解决办法:使用进样端平滑的毛细管。
  4.毛细管插入样品引起零进样。
  原因与结果:额外进样。
  解决办法:不能消除,但能量化。
  5.毛细管电泳仪分壁吸附样品。
  原因与结果:峰形畸变无样品流出。
  解决办法:改变缓冲液pH值,增加浓度,使用添加剂。
  6.信噪比低。
  原因与结果:积分误差。
  解决办法:优化积分参数,增加样品浓度,用峰高测定。
  7.电动进样。
  原因与结果:样品基质不同。
  解决办法:采用压力进样。

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