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毛细管电泳仪使用时需要注意这几点

发布时间:2022-03-03      点击次数:257
  毛细管电泳仪是根据在电解质溶液中,带电粒子在高压电场作用下,以不同的速度定向迁移的现象来达到组分分离的目的。各组分分离后通过检测器进行检测,并根据各组分的迁移时间和响应值进行定性、定量分析。电泳的支持物是弹性石英毛细管。仪器主要由高压电源、进样器、毛细管柱、检测器、数据处理系统等几部分构成。
  由于受毛细管内总体积的制约,对于浓度很稀的样品,毛细管电泳仪不能象HPLC那样可加大进样量来提高检测灵敏度,但可采取一些措施来改善。
  1.当样品缓冲液的电导明显低于(100倍以上)电泳缓冲液时,毛细管两端加上电压后可在样品区带前后形成一个更大的电场,使样品溶液中的分子迁移的更快。当这些分子到达电泳缓冲液边界时,由于电场减弱,迁移速度减慢,使样品区带由宽变窄,浓度提高,而达到浓缩的目的。
  2.当样品缓冲液和电极缓冲液的电导一样,而样品浓度较稀,不适合再作稀释时,可在进样前先吸入一些水,也能达到浓缩的目的。无论采取何种进样方式,上述方法都可使样品堆积浓缩。但由于在堆积区带电势陡降,会导致此区带温度升高。
  3.毛细管插入样品溶液后,应立即开始进样操作,完成后迅速移至缓冲液中开始电泳。否则会产生毛细作用和虹吸现象,引起误差并使谱带展宽。
  4.电极不要和毛细管接触,样品贮器和缓冲液贮器液面的高度应保持平衡。
  5.使系统尽可能保持恒温。因温度直接影响粘度,而影响进样量的恒定。
  6.样品溶液中的溶剂必须与缓冲液互溶,前者的离子强度应低于后者。
  7.防止样品溶液和缓冲液蒸发、损耗。

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